安捷倫（Agilent ）自 1999 年從惠普公司分離出來成為獨(dú)立的公司。自那時(shí)起，安捷倫公司先后榮獲了數(shù)百個(gè)創(chuàng)新獎(jiǎng)項(xiàng)，并且

獲得了比獎(jiǎng)項(xiàng)更多的發(fā)明專L。

    安捷倫（Agilent ）在生命科學(xué)、診斷和應(yīng)用化學(xué)市場(chǎng)領(lǐng)域市場(chǎng)份額巨大。安捷倫為全球多個(gè)國家的實(shí)驗(yàn)室提供儀器、服務(wù)、

消耗品、應(yīng)用與專業(yè)知識(shí)。

     Agilent AdvanceBio SEC 色譜柱能夠簡單快速而準(zhǔn)確地進(jìn)行 mAb 聚集體定量和片段分析。

    AdvanceBio SEC 提供 2.7 和 1.9 μm 兩種不同填料粒徑。這些創(chuàng)新的體積排阻色譜柱由安捷倫設(shè)計(jì)和制造，可實(shí)現(xiàn)高分離

度和高效分離，同時(shí)具有穩(wěn)定可靠的性能。不同色譜柱、不同批次以及不同實(shí)驗(yàn)室均可獲得一致結(jié)果，確保方法可以跨部門和

地區(qū)轉(zhuǎn)移，有助于消除不確定性

    AdvanceBio SEC 1.9 μm 色譜柱的設(shè)計(jì)旨在改善使用 UHPLC 分離蛋白質(zhì)聚集體和片段的分離度，同時(shí)提高分離速度。

    經(jīng)過優(yōu)化的亞 2 微米填料為單分散狀態(tài)，并通過獨(dú)特的親水鍵合化學(xué)改性，提供色譜柱重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，防止次級(jí)相互作用

和蛋白質(zhì)吸附。AdvanceBio SEC 1.9 μm 色譜柱旨在滿足各部門對(duì)定性和定量關(guān)鍵質(zhì)量屬性 (CQA) 分析和方法轉(zhuǎn)移的需求。

●實(shí)現(xiàn)聚集體和片段的高效、高分離度分離以及準(zhǔn)確定量

●減少與 mAb、ADC 和其他蛋白質(zhì)的次級(jí)相互作用

●確保一致的色譜柱性能，避免重復(fù)工作

●提高色譜柱壽命和分析效率，實(shí)現(xiàn)可靠的 CQA 分析

目前 Agilent Bio SEC 1.9μm    生產(chǎn)在售的貨號(hào)有：

◆ 分子量下限：1000 Da       分子量上限：80000 Da            額定壓力：620 bar

PL1580-1250        AdvanceBio SEC 120 ? 色譜柱，1.9 μm, 4.6 x 30 mm

PL1580-3250        AdvanceBio SEC 120 ? 色譜柱，1.9 μm, 4.6 x 150 mm

PL1580-5250        AdvanceBio SEC 120 ? 色譜柱，1.9 μm, 4.6 x 300 mm

PL1980-3250PK        AdvanceBio SEC 120A 柱，1.9 μm 2.1 x 150 mm，PEEK

PL1980-1250PK        AdvanceBio SEC 120A 柱，1.9 μm 2.1 x 50 mm，PEEK

◆ 分子量下限：2000 Da       分子量上限：700000 Da            額定壓力：620 bar

PL1980-1201PK        AdvanceBio SEC 200A 柱，1.9 μm 2.1 x 50 mm，PEEK

PL1980-3201PK        AdvanceBio SEC 200A 柱，1.9 μm 2.1 x 150 mm，PEEK

PL1580-1201        AdvanceBio SEC 200A 柱，1.9 μm 4.6 x 30 mm，

PL1580-3201        AdvanceBio SEC 200A 柱，1.9 μm 4.6 x 150 mm

PL1580-5201        AdvanceBio SEC 200A 柱，1.9 μm 4.6 x 300 mm

目前 Agilent Bio SEC 2.7μm    生產(chǎn)在售的貨號(hào)有：

◆ 分子量下限：100 Da       分子量上限：120000 Da            額定壓力：400 bar

PL1580-3350            AdvanceBio SEC 130?, 4.6 x 150 mm,2.7 μm, LC column

PL1580-5350            AdvanceBio SEC 130?, 4.6 x 300 mm, 2.7 μm, LC column

PL1580-1350            AdvanceBio SEC 130?, 4.6 x 50 mm, 2.7 μm 保護(hù)柱

PL1180-3350            AdvanceBio SEC 130?, 7.8 x 150 mm, 2.7 μm, LC column

PL1180-5350            AdvanceBio SEC 130?，7.8 x 300 mm, 2.7 μm，LC column

PL1180-1350            AdvanceBio SEC 130?, 7.8 x 50 mm, 2.7 μm  保護(hù)柱

◆ 分子量下限：5000 Da       分子量上限：1250000 Da            額定壓力：400 bar

PL1580-3301            AdvanceBio SEC 300?, 4.6 x 150 mm, 2.7 μm, LC column

PL1580-5301            AdvanceBio SEC 300?，4.6 x 300 mm, 2.7 μm，LC column

PL1580-1301            AdvanceBio SEC 300?, 4.6 x 50 mm, 2.7 μm  保護(hù)柱

PL1180-3301            AdvanceBio SEC 300?, 7.8 x 150 mm, 2.7 μm, LC column

PL1180-5301            AdvanceBio SEC 300?, 7.8 x 300 mm, 2.7 μm, LC column

PL1180-1301            AdvanceBio SEC 300?, 7.8 x 50 mm, 2.7 μm  保護(hù)柱

反相色譜柱和流動(dòng)相指南：
【孔徑的選擇】
如果溶質(zhì)分子量小于5000，則選擇小孔徑(60-120 ?) 填料柱，否則，應(yīng)選用300 ? 孔徑的填料柱。
【粒徑的選擇】
高效液相柱填料粒徑一般是5 μm，現(xiàn)在方法開發(fā)主要采用3.5 μm 及更小的色譜柱。如果需要進(jìn)行快速分析或更高分離度分析，可以使用1.8 μm 和2-3 μm 粒徑的填料。
采用這些填料的色譜柱越短，越可能獲得更快速的高分離度分離，1.8 μm 填料粒徑具有較高的柱效，2.7 μm 表面多孔填料能提供類似結(jié)果。
選擇1.8、2.7、3.5 和5 μm 填料粒徑，從最小填料粒徑開始進(jìn)行HPLC 或UHPLC 分析道道400 bar、600 bar 或1200 bar，以獲得Z好的結(jié)果。
【色譜柱柱型】
在過去的幾年中，選擇Z佳色譜柱規(guī)格進(jìn)行方法開發(fā)已發(fā)生巨大變化?，F(xiàn)在更常用的是3.0 mm 內(nèi)徑或2.1 mm 內(nèi)徑柱，而不是4.6 mm 內(nèi)徑柱，因?yàn)槠淙軇┯昧枯^少，而且能與MS 檢測(cè)器兼容。較短的50、75 和100 mm 長的色譜柱可能是良好的起始選擇，只有當(dāng)需要更高分離度或使用3.5 和5 μm 粒徑色譜柱時(shí)才使用長柱。

硅膠類型和鍵合相：
【基本材料】
液相柱的基本材料采用Z高純度的全多孔硅膠填料，與大多數(shù)安捷倫ZORBAX 柱中使用的填料一樣。當(dāng)然也有更多選擇，包括在高pH 下穩(wěn)定的聚合物材料（常用于PLRP-S 柱）和表面多孔硅膠填料（Poroshell 120 柱使用）。高純度B 型硅膠，包括ZORBAX Eclipse Plus 中使用的ZORBAX Rx-Sil 和表面多孔Poroshell 120，為大多數(shù)方法的首選。
A 型硅膠，如ZORBAX SIL，用于早期的ZORBAX 柱，仍在生產(chǎn)并為許多方法所用。

【鍵合相】
鍵合相的首選材料為C18 或C8，建議起始色譜柱選擇Eclipse Plus C18 或Poroshell 120 EC-C18。這兩種色譜柱能提供出色的峰形，能在pH 2-9 范圍內(nèi)使用，并適用最通用的LC 和LC/MS 流動(dòng)相。如果目標(biāo)樣品溶質(zhì)在這類色譜柱上沒有完全分離，CN 和苯基柱道道包括苯基、苯基己基和二苯基柱道道可以提供與直鏈烷烴顯著不同的選擇性，而對(duì)分離產(chǎn)生影響。

【pH 值和流動(dòng)相】
對(duì)于反相系統(tǒng)流動(dòng)相的選擇，應(yīng)首先考慮有機(jī)改性劑的選擇。乙腈是最常用的有機(jī)改性劑。使用含乙腈、甲醇和四氫呋喃(THF) 流動(dòng)相的選擇性和樣品保留有明顯區(qū)別。這些溶劑對(duì)樣品的溶解性可能不同，需要使用指定的溶劑。某些改性劑不能在某些波長下進(jìn)行UV 檢測(cè)（如甲醇在200 nm 下）。

色譜柱的保護(hù)
保護(hù)柱和在線過濾器是經(jīng)濟(jì)而易用的色譜柱保護(hù)工具。他們能夠改善結(jié)果的準(zhǔn)確度，在提高可靠性的同時(shí)延長分析柱壽命。填充任何填料的所有規(guī)格的色譜柱都可以使用色譜柱保護(hù)。

【保護(hù)柱】
保護(hù)柱保護(hù)色譜柱，Z大限度地減少污染對(duì)柱效的影響。對(duì)于大多數(shù)類型的ZORBAX 填料，都有預(yù)填充的ZORBAX 卡套柱保護(hù)柱芯。保護(hù)柱芯有不同的內(nèi)徑，為各種類型的色譜柱提供高效保護(hù)。保護(hù)柱也可以用于許多非Zorbax 色譜柱。可用的保護(hù)柱可參見各自的色譜柱列表。

【低容量在線過濾器】
建議每個(gè)色譜柱都要用低容量在線過濾芯，保護(hù)色譜柱不受顆粒物質(zhì)污染。在線過濾器阻擋了顆粒（來自未過濾的樣品和/或洗脫液）使其不堵塞分析柱篩板，延長了分析柱的壽命。使用保護(hù)柱可能影響小體積色譜柱和/或粒徑非常小的填料色譜柱的柱效。對(duì)這類色譜柱，強(qiáng)烈建議使用低體積在線過濾器。為了獲得Z高柱效，應(yīng)使用小的0.5 μm 篩板。

【可更換色譜柱入口篩板】
如果HPLC 色譜柱在沒有在線預(yù)柱過濾器安裝保護(hù)柱的情況下使用，分析柱可能出現(xiàn)堵塞。目前所用的高效填充工藝不允許更換色譜柱的篩板。如果更換篩板，可能會(huì)影響柱效。對(duì)于2.1、3.0、4.6 和9.4 mm 的標(biāo)準(zhǔn)ZORBAX 填充柱，我們提供PEEK 密封的可更換篩板。

標(biāo)準(zhǔn)硬件色譜柱的可更換入口篩板（PEEK 密封）
   說明                直徑(mm)       單位          部件號(hào)          
窄徑柱                2.1                10/包          280959-904
溶劑節(jié)省柱         3.0                各1 個(gè)        280959-006
分析柱                4.6                10/包          280959-905
半制備柱             9.4                各1 個(gè)        280959-001