安捷倫(Agilent )自 1999 年從惠普公司分離出來(lái)成為獨(dú)立的公司。自那時(shí)起,安捷倫公司先后榮獲了數(shù)百個(gè)創(chuàng)新獎(jiǎng)項(xiàng),并且
獲得了比獎(jiǎng)項(xiàng)更多的發(fā)明專(zhuān)L。
安捷倫(Agilent )在生命科學(xué)、診斷和應(yīng)用化學(xué)市場(chǎng)領(lǐng)域市場(chǎng)份額巨大。安捷倫為全球多個(gè)國(guó)家的實(shí)驗(yàn)室提供儀器、服務(wù)、
消耗品、應(yīng)用與專(zhuān)業(yè)知識(shí)。
AdvanceBio Peptide Plus 色譜柱為反相、表面多孔顆粒填料液相色譜柱,經(jīng)過(guò)優(yōu)化適用于分離目標(biāo)多肽和雜質(zhì),以及進(jìn)行
翻譯后修飾分析。這類(lèi)色譜柱采用基于 100 ? 孔徑、2.7 μm 填料顆粒的混合封端 C18 固定相,經(jīng)改性后表面帶電。
AdvanceBio Peptide Plus 色譜柱使您可以通過(guò) LC/MS 可靠鑒定多種關(guān)鍵質(zhì)量屬性。它們能夠提供快速確認(rèn)和鑒定目標(biāo)蛋白
質(zhì)和多肽所需的速度、靈敏度和效率。
●可靠的結(jié)果 — 由高效 Poroshell 顆粒形態(tài)提供的高分離度分離,即使在較高載樣量下分離性能也絲毫不受影響。
●優(yōu)異的峰形 — 經(jīng)化學(xué)改性的二氧化硅具有混合帶電的 C-18 表面,采用甲酸作為流動(dòng)相添加劑可獲得優(yōu)異的性能。
●不同的選擇性 — 提供與傳統(tǒng) C18 色譜柱不同的選擇性,可改善關(guān)鍵組分的分離。
●更高的靈活性 — 2.7 μm、100 ? 直徑的表面多孔顆粒填料以及多種尺寸可兼容高效液相色譜和超高效液相色譜系統(tǒng)。
●質(zhì)量控制 — 使用多肽標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)色譜柱進(jìn)行批次測(cè)試,確保質(zhì)量可靠。
目前 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 生產(chǎn)在售的貨號(hào)有:
◆ pH 范圍:1-11 額定壓力:600 bar 孔徑:100 ? 較高溫度:90 °C
699775-949 AdvanceBio Peptide Plus 2.1 x 50 mm, 2.7 μm
695775-949 AdvanceBio Peptide Plus 2.1 x 150 mm, 2.7 μm
695775-949K AdvanceBio Peptide Plus 2.1 x 150 mm, 2.7 μm,方法驗(yàn)證工具包
693775-949 AdvanceBio Peptide Plus 2.1 x 250 mm, 2.7 μm
693975-349 AdvanceBio Peptide Plus 3.0 x 150 mm, 2.7 μm
693975-949 AdvanceBio Peptide Plus 4.6 x 150 mm, 2.7 μm
821725-954 UHPLC 保護(hù)柱,AdvanceBio Peptide Plus,2.1 mm, 2.7 μm,3 包
823750-952 UHPLC 保護(hù)柱,AdvanceBio Peptide Plus,3.0 mm, 2.7 μm,3 包
820750-940 UHPLC 保護(hù)柱,AdvanceBio Peptide Plus,4.6 mm, 2.7 μm,3 包
反相色譜柱和流動(dòng)相指南:
【孔徑的選擇】
如果溶質(zhì)分子量小于5000,則選擇小孔徑(60-120 ?) 填料柱,否則,應(yīng)選用300 ? 孔徑的填料柱。
【粒徑的選擇】
高效液相柱填料粒徑一般是5 μm,現(xiàn)在方法開(kāi)發(fā)主要采用3.5 μm 及更小的色譜柱。如果需要進(jìn)行快速分析或更高分離度分析,可以使用1.8 μm 和2-3 μm 粒徑的填料。
采用這些填料的色譜柱越短,越可能獲得更快速的高分離度分離,1.8 μm 填料粒徑具有較高的柱效,2.7 μm 表面多孔填料能提供類(lèi)似結(jié)果。
選擇1.8、2.7、3.5 和5 μm 填料粒徑,從最小填料粒徑開(kāi)始進(jìn)行HPLC 或UHPLC 分析道道400 bar、600 bar 或1200 bar,以獲得Z好的結(jié)果。
【色譜柱柱型】
在過(guò)去的幾年中,選擇Z佳色譜柱規(guī)格進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)已發(fā)生巨大變化?,F(xiàn)在更常用的是3.0 mm 內(nèi)徑或2.1 mm 內(nèi)徑柱,而不是4.6 mm 內(nèi)徑柱,因?yàn)槠淙軇┯昧枯^少,而且能與MS 檢測(cè)器兼容。較短的50、75 和100 mm 長(zhǎng)的色譜柱可能是良好的起始選擇,只有當(dāng)需要更高分離度或使用3.5 和5 μm 粒徑色譜柱時(shí)才使用長(zhǎng)柱。
硅膠類(lèi)型和鍵合相:
【基本材料】
液相柱的基本材料采用Z高純度的全多孔硅膠填料,與大多數(shù)安捷倫ZORBAX 柱中使用的填料一樣。當(dāng)然也有更多選擇,包括在高pH 下穩(wěn)定的聚合物材料(常用于PLRP-S 柱)和表面多孔硅膠填料(Poroshell 120 柱使用)。高純度B 型硅膠,包括ZORBAX Eclipse Plus 中使用的ZORBAX Rx-Sil 和表面多孔Poroshell 120,為大多數(shù)方法的首選。
A 型硅膠,如ZORBAX SIL,用于早期的ZORBAX 柱,仍在生產(chǎn)并為許多方法所用。
【鍵合相】
鍵合相的首選材料為C18 或C8,建議起始色譜柱選擇Eclipse Plus C18 或Poroshell 120 EC-C18。這兩種色譜柱能提供出色的峰形,能在pH 2-9 范圍內(nèi)使用,并適用最通用的LC 和LC/MS 流動(dòng)相。如果目標(biāo)樣品溶質(zhì)在這類(lèi)色譜柱上沒(méi)有完全分離,CN 和苯基柱道道包括苯基、苯基己基和二苯基柱道道可以提供與直鏈烷烴顯著不同的選擇性,而對(duì)分離產(chǎn)生影響。
【pH 值和流動(dòng)相】
對(duì)于反相系統(tǒng)流動(dòng)相的選擇,應(yīng)首先考慮有機(jī)改性劑的選擇。乙腈是最常用的有機(jī)改性劑。使用含乙腈、甲醇和四氫呋喃(THF) 流動(dòng)相的選擇性和樣品保留有明顯區(qū)別。這些溶劑對(duì)樣品的溶解性可能不同,需要使用指定的溶劑。某些改性劑不能在某些波長(zhǎng)下進(jìn)行UV 檢測(cè)(如甲醇在200 nm 下)。
色譜柱的保護(hù)
保護(hù)柱和在線過(guò)濾器是經(jīng)濟(jì)而易用的色譜柱保護(hù)工具。他們能夠改善結(jié)果的準(zhǔn)確度,在提高可靠性的同時(shí)延長(zhǎng)分析柱壽命。填充任何填料的所有規(guī)格的色譜柱都可以使用色譜柱保護(hù)。
【保護(hù)柱】
保護(hù)柱保護(hù)色譜柱,Z大限度地減少污染對(duì)柱效的影響。對(duì)于大多數(shù)類(lèi)型的ZORBAX 填料,都有預(yù)填充的ZORBAX 卡套柱保護(hù)柱芯。保護(hù)柱芯有不同的內(nèi)徑,為各種類(lèi)型的色譜柱提供高效保護(hù)。保護(hù)柱也可以用于許多非Zorbax 色譜柱??捎玫谋Wo(hù)柱可參見(jiàn)各自的色譜柱列表。
【低容量在線過(guò)濾器】
建議每個(gè)色譜柱都要用低容量在線過(guò)濾芯,保護(hù)色譜柱不受顆粒物質(zhì)污染。在線過(guò)濾器阻擋了顆粒(來(lái)自未過(guò)濾的樣品和/或洗脫液)使其不堵塞分析柱篩板,延長(zhǎng)了分析柱的壽命。使用保護(hù)柱可能影響小體積色譜柱和/或粒徑非常小的填料色譜柱的柱效。對(duì)這類(lèi)色譜柱,強(qiáng)烈建議使用低體積在線過(guò)濾器。為了獲得Z高柱效,應(yīng)使用小的0.5 μm 篩板。
【可更換色譜柱入口篩板】
如果HPLC 色譜柱在沒(méi)有在線預(yù)柱過(guò)濾器安裝保護(hù)柱的情況下使用,分析柱可能出現(xiàn)堵塞。目前所用的高效填充工藝不允許更換色譜柱的篩板。如果更換篩板,可能會(huì)影響柱效。對(duì)于2.1、3.0、4.6 和9.4 mm 的標(biāo)準(zhǔn)ZORBAX 填充柱,我們提供PEEK 密封的可更換篩板。
標(biāo)準(zhǔn)硬件色譜柱的可更換入口篩板(PEEK 密封)
說(shuō)明 直徑(mm) 單位 部件號(hào)
窄徑柱 2.1 10/包 280959-904
溶劑節(jié)省柱 3.0 各1 個(gè) 280959-006
分析柱 4.6 10/包 280959-905
半制備柱 9.4 各1 個(gè) 280959-001
地 址:揚(yáng)州市邗江區(qū)文匯西路162號(hào)聯(lián)合廣場(chǎng)B座1203室
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